HoLoPep
Diverse Peptide mit spezifischen Hafteigenschaften auf verschiedenen Oberflächen wie Edelstahl, natürliche oder synthetische Polymere wurden bereits mit molekularen Screeningverfahren in Henkel AG identifiziert. Um das Potenzial der identifizierten Peptide für die verschiedensten Anwendungen in Produkten wie Wasch- und Reinigungsmittel sowie Kosmetik und Körperpflege und/oder Klebstoff in vollem Umfang und in den anwendungsnahen, standardisierten Prüfprotokollen der Henkel AG testen zu können, sind größere Mengen , schätzungsweise mehr als 100 Gramm, erforderlich.
Die Herstellung von Peptiden im dreistelligen Grammmaßstab sowie die Evaluierung der konkurrenzfähigen Produktionssysteme soll Gegenstand des Projektes sein. Dabei wird das Scale-Up des bestehenden E. coli Produktionssystems auf ein 100 Liter Maßstab erfolgen und alternative extrazelluläre Produktionsplattformen untersucht.
Produktionsorganismen wie die filamentösen Pilze A. oryzae und/oder T. reesei überprüft und bewertet werden. Des Weiteren wird ein geeignetes Verfahren entwickelt, welches die Bereitstellung der Peptide oder weitere Formulierungsarbeiten in einem für technische Anwendungen geeigneten Kostenrahmen ermöglicht. Verschiedene Grundoperationen wie Filtration, Fällung, Chromatographie bieten sich hierbei an und müssen verglichen werden. Zusätzlich wird der Einsatz der Ankerpeptid-Technologie als kostengünstige Möglichkeit zur Aufarbeitung der Peptide untersucht. Aspekte an die geforderte Reinheit, der chemischen oder enzymatischen Abtrennung von zusätzlichen Sequenzen, zum Beispiel Inclusionbody-, Reinigungs-Tags, Ankerpeptide, werden von Beginn an in der Prozessentwicklung adressiert.
Nach erfolgreichem Abschluss des HoLoPep-Projekts im Labormaßstab, bis zu 100 Liter Fermenter in der Phase 1 von Bio4MatPro, ist die Überführung in den Demonstrator- bzw. Pilot-Maßstab in Phase 2 vorgesehen. Schließlich ist bei positivem Verlauf, die Erprobung des erarbeiteten Verfahrens in den Pilotmaßstab Gegenstand der weiteren Projektphasen.